下尿路炎是泌尿外科的一种常见病,其病因、临床症状和治疗上存在许多难题，特别是药物治疗仍然相当困难。

为了探讨物理方法治疗下尿路炎的可行性，我们用Beagle犬制作了细菌引发下尿路炎的动物模型,现将结果报道如下。

材料与方法

1. 实验动物：健康成年Beagle犬，戊巴比妥钠1ml/kg静脉麻醉后，消毒外生殖器及尿道外口，插入无菌F6尿道测压管（人用）进入膀胱，留取中段尿进行细菌培养,结果为阴性的Beagle犬人组，共计6条,平均犬龄24个月，体质量11~13kg。所有实验犬由华中科技大学同济医学院附属同济医院实验动物中心（实验动物设施使用证明号:00023472；动物质量合格证号=00018012）提供并统一管理，饲养于清洁级环境，所有操作经同济医科大学实验动物关怀和利用委员会许可。

2. 动物模型的建立:将Beagle犬随机分为模型组（3条）和对照组（3条），采用标准致病菌大肠埃希菌（ATCC25922,由本医学院微生物实验室提供），使用前置37℃培养箱内培养18h,无菌生理盐水配成1.5x10⁸CFU/ml浓度菌液。所有Beagle犬给予戊巴比妥钠1ml/kg静脉麻醉后，固定四肢，在无菌条件下将F6尿道测压管插入膀胱引流尿液，模型组每次灌注菌液2.5ml,对照组灌注等量0.9%生理盐水，保留5min。实验初3d每天1次，以后分别于第5、7、9天灌注，末次灌注后72h随机处死两组犬，行细菌培养鉴定和病理学观察。

3. 细菌培养鉴定：以无菌方式取出膀胱和各段尿道,置于含1ml灭菌生理盐水的无菌小平皿中，剪碎组织后推开，于37℃孵箱中培养24~48h后，对可疑菌落进行革兰氏染色，同时将菌落分别转种于伊红美蓝平板、蛋白臆水培养管、磷酸盐葡萄糖豚水培养管和枸橡酸盐斜面上，再次37龙孵箱中培养24~48h后，加入靛基质试液、甲基红试液和V-P试液，观察结果。

4. 药物敏感实验:采用纸片扩散法(K-B法)。在M-H琼脂培养基上，每2个纸片间的中心距离不少于24mm。根据对抑菌环直径大小的判断标准报告敏感(>15mm)、耐药(<10mm)和中介(10~15mm)。

         5. 病理学观察:取出膀胱和尿道组织，10%福马林固定,常规制片后行苏木素-伊红(HE)染色，光镜检查拍片。

结果

       1. 细菌培养鉴定:模型组所有标本均培养出边缘整齐、湿润、大的呈灰白颜色的菌落，革兰氏染色为革兰氏阴性，菌体为粗而短的杆菌。伊红美蓝平板培养基上菌落形态呈现为大而湿润、伴有紫黑色金属光泽。靛基质试验、甲基红试验、V-P反应和枸檬酸盐利用试验(1MVC)结果分别为+、+、-、-,为大肠埃希菌的典型生化反应。对照组所有标本无细菌生长。

      2. 药物敏感实验:大肠埃希杆菌对抗生素耐药率最高的是氨苯西林(89.8%)和哌拉西林(83.3%),与文献［1-2］报道相符。其次是复方新诺明、四环素、头抱哩琳、头抱咲辛、头抱克洛、庆大霉素、头抱曲松、环丙沙星、诺氟沙星、头泡唾胯等。对抗生素最敏感的是美罗培南和亚胺培南，与文献［3-4］报道一致,其次是哌拉西林/他喚巴坦、吠喃妥因和阿米卡星。

     3. 病理学观察:对照组前列腺上皮细胞多为立方或柱状，腺腔分泌物较均匀。模型组黏膜充血、水肿，呈深红色，以膀胱三角区最为明显。腺上皮呈扁平、立方与高柱状混杂，黏膜脱落，腺腔分泌物减少,毛细血管明显扩张，间质内可见大量的中性粒细胞和淋巴浸润。与正常尿道组织对比，受感染的尿道镜下表现为尿道黏膜边缘不齐,有溃疡、水肿等改变，黏膜表面有浆液性分泌物黏合，并有大量的中性粒细胞、浆细胞和淋巴细胞浸润，毛细血管明显扩张。

讨论

  尿路感染是由病原菌直接侵犯尿路而引起的炎性病变，其发生率为6.82%⑸，在感染性疾病中仅次于上呼吸道感染，居第2位⑹。本实验模拟并采用临床上常见的泌尿系感染途径，定量、多次对Beagle犬进行经尿道膀胱灌注,结果显示与对照组比较，模型组的细菌培养差异显著，呈典型的大肠埃希菌生长特征，证实多次膀胱灌注法是建立下尿道炎动物模型的简洁、有效的实验方法。

  临床下尿路感染常呈现反复发作，经久不愈，防治难度大且愈后不良等特性，本实验中膀胱和尿道组织HE染色切片证实，E.coli致膀胱和尿道黏膜充血、水肿，表面有浆液性分泌物黏合，严重处有脱落,形成溃疡现象，毛细血管明显扩张合并大量的中性粒细胞、浆细胞和淋巴细胞浸润，此病理改变与人类的慢性尿道炎和慢性膀胱炎的病理表现特征基本相符。

  预防使用抗菌药物也是引起尿路感染危险因素，不合理地使用抗菌药物可导致菌群失调、免疫功能损伤，增加条件致病菌和真菌的继发感染的机会。调査发现泌尿外科抗菌药物的使用存在不合理现象，如选择不当、用药指征掌握不明确、用药时间过长等⑺，同时由于部分尿路感染表现不明显，常常掩盖感染征象，使临床医师有倾向预防性应用抗菌药物⑻，应引起重视。我们应该注意合理使用抗菌药物，根据细菌培养及药物敏感实验选用抗菌药物。本试验通过药物敏感实验证明，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠球菌是尿路感染主要致病菌，药物敏感实验以对B-内酰胺类敏感性高,故抗感染治疗应首选美罗培南和亚胺培南，其次选用哌拉西林/他哩巴坦、头弛哌酮/舒巴坦、氨曲南等内酰胺类或喳诺酮等广谱抗生素，必要时两者联合应用.

参考文献

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Beagle犬细菌性下尿路炎动物模型的建立.pdf