洁悠神敷料对轻度牙周炎龈下菌斑中卟啉单胞菌的影响及临床疗效*

符义富1,傅尧',游丽萍1,李兵',吴文蕾?

(南京大学医学院附属口腔医院:1.检验科;2.牙周科,江苏南京210008)

摘要:目的探讨洁悠神敷料对轻度牙周炎患者龈下菌斑中牙龈叭昧单胞茵(P.g)的影响及临床疗效,为临床治疗和预防牙周病提供参考。方法选择55例轻度牙周炎患者,随机分为⒉纽,实验组(28例)在被检牙局部喷涂洁悠神敷料,对照组(27例)喷涂3%双氧水,每组在喷涂后分别采集龈下菌斑,采用16S rRNA序列分析技术对龈下菌斑中P.g 进行检测,分析细菌检出率的变化,同时记录被检牙的菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI),探诊深度(PD),牙齿松动度(TM)等相关指标。结果﹒对照组和实验纽的检出率分别为79.6%,39.3%,差异有统计学意义(P<0.01),21牙位的检出率均低于26牙位(P<0.05);洁悠神敷料用药Ⅰ周后可使PLI.GI、PD、TM等指标明显改善。结论洁悠神敷料作为一种轻度牙周炎的辅助用药,具有良好的菌斑抑制效果和促进正常口腔卫生环境的建立,是一种局部治疗和预防轻度牙周炎的有效抗菌敷料。

关键词:牙周炎;洁悠神敷料;牙龈吓啉单胞菌

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2013.24.072

文献标识码:B

文章编号:1673-413O( 2013)24-3407-O2

牙周炎是菌斑内微生物之间以及机体与菌斑之间相互作用的结果﹐而与牙周组织破坏关系最为密切的是龈下菌斑﹐吓啉单胞菌(P.g)被认是牙周炎最主要的致病菌﹐可产生多种毒力因子叩,在牙周炎发生发展中的作用不容忽视,有效抑制菌斑中的P.g是治疗和预防牙周炎的重要手段[吧。各类抗菌药物作为口腔预防用品及临床治疗药剂已广泛应用,为了防止耐药菌的产生,局部应尽量减少抗菌药物的使用[3。本研究将洁悠神敷料喷涂于菌斑部,通过16S rRNA序列分析技术检测菌斑细菌中 P.g变化,探讨洁悠神抗菌材料对口腔龈下菌斑的作用,同时检测临床指标﹐评价洁悠神抗菌材料的临床疗效,为临床防治牙周炎局部感染和个体序列化治疗提供理论依据。

1资料与方法

1.1一般资料均来自本院门诊牙周科治疗的55例患者(男29例,女26 例,年龄31~75岁),所有患者均经临床检查和X线检查确诊为轻度牙周炎﹐均愿接受洁悠神敷料治疗﹐并签署知情同意书﹔按接诊顺序﹐随机分为实验组(洁悠神组28例)和对照组(双氧水组27例);纳入标准:(1)受试牙至少有1个部位探诊深度大于3 mm,探诊出血;(2)临床附着水平大于或等于2 mm;(3)X线显示牙槽骨吸收超过根长 1/3。(4)近3个月内未服抗菌药物,未做牙周洁治术,未带矫治器及修复体﹔无糖尿病等全身疾病﹐女性未怀孕。

1.2仪器与试剂洁悠神抗菌材料已通过医院伦理论证进行临床研究,批号:国食药监械(准)2012第3640138。由本课题的合作单位南京神奇科技开发有限公司提供(规格30毫升/瓶,剂量为0.1毫升/次),3%双氧水(上海凌峰制药厂),PCR试剂盒,蛋白酶K液(上海生工生物工程有限公司),PCR扩增仪(PTC-200)。

1.3被检牙位及观察指标(l)根据Loe和 Silness( 1963)的方法检查21、26 牙龈指数、探诊深度。(2)菌斑指数(PLI) ; o无菌斑;1探针轻划龈下即发现菌斑﹔2肉眼可见菌斑;3大量菌斑。(3)牙齿松动度:0无松动;I颊舌方向松动;Ⅱ颊舌和近远中方向松动;Ⅲ颊舌、近远中和垂直方向松动。

1.4标本的采集龈下菌斑标本均由本院牙周科医生收集。先对被检牙进行临床检查后,再用无菌龈下刮治器取被检牙龈下菌斑,立即放入无菌Eppendorf 管中,一30℃保存待检。用药方法:在菌斑位点(缘)喷涂洁悠神抗菌材料或3%双氧水，剂量同为0.1毫升/次,每日1 次。采样时间为每例患者喷涂药物后1周。

1.5 P.g的检测酚氯仿提取DNA,用P.g 16S rRNA特异引物PCR扩增,上游:5'-AGG CAG CTT GCC ATA CTG CG-3'﹔下游:5'-ACT GTT AGC AAC TAC CGA TGT-3';预期扩增片段长度197 bp[。质量控制:所有PCR反应均采用国际参考标准菌株P.g(A TCC33277)作为阳性对照。

1.6统计学处理数据处理采用SPSS13.0统计软件,计量资材以录士s表示,两样本之间均数比较用﹖检验﹔组内比较用配对方﹖检验﹐计数资料采用检验。P之0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1洁悠神敷料用药1周后的临床疗效本项研究共对55例患者的21和26牙位进行了检查,对照组与实验组的牙龈指数(GI为(2.44士0.63)和(1.97士0.66),差异有统计学意义( P之0.01),牙周探诊深度(PD)为( 2.67士0.74)、(2.43士0.59)mm,差异无统计学意义(P≥0.05)。与对照组相比,PLI明显降低,差异有统计学意义(P之0.05);牙齿松动度(O、I 、ll 、Ⅲ)实验组56个牙位用药前分别为41、10,5,0个牙位,用药后分别为44,8,4、0个牙位,对照组无变化;在使用洁悠神敷料处理后牙周组织红肿、牙齿松动度、牙周袋深度﹑菌斑指数等指标较对照组均有不同程度的改善﹐患者症状减轻,见表1。

2.2 P.g 的检出率P.g 16S RNA扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,结果见图1(见《国际检验医学杂志》网站“论文附件”)。对照组和实验组 P.g检出率分别为79.6%(43/54)、39.3 %(22/56),对照组均高于实验组,差异有统计学意义(P之0.01),其中对照组和实验组21牙位的P.g检出率分别为62.9%(17/27)、21.4%(6/28),26 牙位的P.g检出率分别为96.3%(26/27),57.1%(16/28),21 牙位的P.g检出率均低于26牙位,差异有统计学意义(P<0.05。

3讨论

牙周炎的发病是由特定的牙周致病菌感染引起的,特别是龈下菌斑中的刺激物和细菌附于牙面,构成了一个以细菌为主体的生态环境,它是细菌在牙体表面生存,代谢,致病的具体环境,是引起牙周炎的始动因素[4。Hillman等[认为﹐龈下菌群存在着有益菌和致病菌之间的动态平衡,当致病菌数量减少,可促进牙周组织的健康状态;因此寻找理想的局部抗感染新材料建立菌斑的微生态平衡显得尤为重要。

洁悠神敷料为新开发的一种高分子活性剂,其水溶性制剂喷洒在牙体黏膜表面后形成分子级隐形抗菌敷料,以正电荷层和胶联层复式叠加﹔胶联层为高分子,以化学键方式与龈下菌斑牢固连接,因此独具长时效抗菌性,正电荷层为阳离子活性剂﹐在牙体或黏膜表面形成正电荷网状膜﹐对带负电荷的细菌、真菌、螺旋体等病原微生物极具强力的渗透性和吸附作用,可以深入到感染的深层组织﹐破坏菌体结构使其赖以生存的酶失去作用而窒息死亡,达到灭菌作用。洁悠神抗菌剂兼有物理抗菌和隐形纱布的双重功效,具有长效抗菌﹑安全抗菌等特点,对于维持口腔生态平衡及维持牙周健康有重要意义。

本研究在洁悠神敷料处理后牙周临床检查结果显示:所有患者用药1周后菌斑指数﹑牙龈指数显著改善,牙周组织红肿、牙齿松动度、牙周袋深度等较对照组均有不同程度的好转。表明洁悠神抗菌治疗是一种可以常规应用的方法,对于改善患者的牙周组织状况﹐去除菌斑和控制病症是行之有效的。

本实验采用16S rRNA序列分析技术对牙周炎患者龈下菌斑中 P.g进行检测,主要了解洁悠神敷料对龈下菌斑中P.g的作用。实验发现,患者首次治疗1周后龈下菌斑中P.g 较对照组均显著减少,说明洁悠神敷料具有杀菌、抑菌作用,可以在较短的时间内迅速消除大量病原菌,促进健康口腔环境的建立与保持,从而有利于恢复患者牙周组织的健康。

本研究中发现无论是对照组还是实验组21牙位的P.g阳性检出率均低于26 牙位(P之0.05),提示21和26牙位的菌丛构成可能不同。

本试验未发现洁悠神敷料对正常黏膜、牙周组织有刺激作用及其他不良反应﹐该材料操作便捷,费用低廉﹐因此笔者认为沽悠神抗菌剂是轻度牙周治疗的一种较为理想的新材料,可能为今后合理、有效地防治牙周炎,提供一条崭新的途径。

参考文献

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